什么是環介導等溫擴增法?
環介導等溫擴增法
環介導等溫擴增法是“Loop-Mediated Isothermal Amplification”的簡稱、是榮研化學獨立研發的一種“簡便、快速、準確、廉價”的基因擴增方法。 環介導等溫擴增法的特征是針對目標DNA鏈上的六個區段設計四個不同的引物然后再利用鏈置換反應在一定溫度下進行反應。反應只需要把基因模板、引物、鏈置換型DNA合成酶、基質等共同置于一定溫度下(60~65℃)、經一個步驟即可完成。擴增效率極高,可在15分~1小時內實現109~1010倍的擴增。而且由于有著高度的特異性,只需根據擴增反應產物的有無即可對靶基因序列的存在與否作出判斷。
特征
不需要使雙鏈DNA先變性成單鏈。
擴增反應在等溫下可持續進行。
擴增的效率極高。
針對六個區段使用四種不同的引物,可特異性擴增靶基因序列。
僅使用一種鏈置換型DNA聚合酶,成本低廉。
擴增產物是在同一條DNA鏈上互補序列周而復始形成大小不一的結構。
當模板是RNA時,僅需加入逆轉錄酶即可與DNA一樣進行擴增。